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电泳原理 电泳原理及电泳八大系统详解

导语:电泳原理与八大电泳系统详解以下文字资料由边肖为大家收集整理。让我们快速看看他们!1.电泳技术的临床应用及进展最早的界面电泳开创了电泳技术的新时代。区带电泳是临床检验领域应用最广泛的技术,也是与临床实践紧密结合的技术。现在已经从手工操作发展到自动化,结束了使用缓冲液进行电泳的历史,使电泳技术进入了一个

电泳原理与八大电泳系统详解以下文字资料由边肖为大家收集整理。让我们快速看看他们!

1.电泳技术的临床应用及进展

最早的界面电泳开创了电泳技术的新时代。区带电泳是临床检验领域应用最广泛的技术,也是与临床实践紧密结合的技术。现在已经从手工操作发展到自动化,结束了使用缓冲液进行电泳的历史,使电泳技术进入了一个新的里程碑。

简要介绍了八种常用技术。

血清蛋白质电泳

新鲜血清经电泳后,能准确描绘患者蛋白质的全貌,有助于许多临床疾病的参考。各种病理现象的图像在各种教科书中都有明确的描述。常见白蛋白减少,某一球蛋白面积升高,提示临床意义不同。

如球蛋白多克隆的增多,β -γ融合的桥接现象,γ区薄而密的寡克隆带,单克隆浆细胞异常增殖产生的单克隆免疫球蛋白带,又称M蛋白带,血清蛋白电泳是首选的实验诊断方法。

免疫固定电泳

血清免疫固定电泳技术是将血清蛋白在琼脂糖凝胶介质上电泳分离后,将蛋白固定剂、各种免疫球蛋白及其轻链抗血清应用于凝胶表面的泳道。孵育扩散后,如果有相应的抗原,就会在合适的位置形成抗原抗体复合物并沉淀。

染色后,蛋白质电泳的参考泳道和抗原抗体沉淀区用氨基黑染色,根据电泳移动距离分离单克隆组分,可以对各种免疫球蛋白及其轻链进行分类。

血清免疫固定电泳用于分类鉴定M蛋白的类型、亚型和轻链,以及本周的蛋白和游离轻链。

同工酶电泳

血清乳酸脱氢酶同工酶电泳

血清肌酸激酶及其亚型同工酶电泳

血清碱性磷酸酶同工酶电泳

血清碱性磷酸酶同工酶电泳有三种不同的结构基因编码或转移后的修饰结果,根据其氨基酸序列可分为小肠型、胎盘型和组织非特异性型,它们各自的表达产物在血清中可呈现不同的意义。

根据麦胚凝集素与碱性磷酸酶-L1和碱性磷酸酶-乙糖链亲和力的不同,血清与WGA相互作用后,碱性磷酸酶同工酶可通过电泳分离。

肝外胆道梗阻转移肝癌时,高分子碱性磷酸酶明显升高,原发性肝癌时肝碱性磷酸酶明显升高,骨转移癌时碱性磷酸酶-B升高。

脂蛋白电泳

血清中的脂蛋白成分可通过自动电泳系统进行分离,显示LDL、VLDL和HDL条带,并可输入TC值计算各种脂蛋白中的胆固醇含量。正常人和冠心病患者之间的LDL-C/HDL-C比值有显著差异。诊断临界值为3.89,诊断敏感性为76.7%,特异性为79.8%。

LDL-C/HDL-C比值是动脉粥样硬化性冠心病的重要危险因素之一,明显优于胆固醇或其他血脂的单一含量指标,且冠心病风险随比值的增加而增加。

凝胶中脂蛋白的等电点不同,不仅可以区分α带、前β带和β带,还因为介质中含有抗LP抗体和阳离子,它们与患者血清中的LP结合形成复合物,而阳离子抑制其他脂蛋白的迁移速度,使LP与其他脂蛋白分离。

前β区和γ区之间出现清晰的LP带。扫描阳性条带后,可以得到条带的面积和百分比,提高了LP检测对心脑血管疾病独立危险因素的敏感性和特异性。

血红蛋白电泳

血红蛋白电泳可以将正常血红蛋白HbA与HbA2分离,也可以检测出大多数异常血红蛋白如HbS、HbD、HbC、HbE等。

当HbA2、HbC和hbe超过20%时,很难对其进行分离和鉴定。

应先用碱性琼脂糖凝胶血红蛋白电泳分离检测正常和异常血红蛋白,通常用于孕妇筛查,再用酸性琼脂糖凝胶血红蛋白电泳分离鉴定异常血红蛋白。

血红蛋白遗传性分子疾病常分为异常Hb病和地中海贫血。

在异常Hb疾病中,如镰状细胞性贫血,异常HbS电泳带位于碱性缓冲液中HbA和HbA2之间。异常血红蛋白的HbC和HbE的电泳迁移率很慢,HbC和HbA2可以重叠。

在PH6.2的柠檬酸缓冲液琼脂糖凝胶电泳中,HbC不能与HbA分离,因此可以检测到HbE。

异常血红蛋白HbD在碱性缓冲液中具有与HbS相同的电泳迁移率,但在PH6.2柠檬酸缓冲液的琼脂糖介质中不能分离HbS和HbA,故可分离检测HbD。

β-地中海贫血是HbA合成受损,电泳图谱可显示HbA2和HbF条带。

糖化血红蛋白电泳

非浓缩尿蛋白电泳

脑脊液电泳

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